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腦脊髓炎動物模型構建

腦脊髓炎動物模型構建

簡要描述:
腦脊髓炎動物模型構建:構建腦脊髓炎(Encephalomyelitis)動物模型是研究多發性硬化(MS)、感染性腦炎或自身免疫性中樞神經系統疾病的重要工具

更新時間:2025-07-11

訪問量:8

廠商性質:其他

腦脊髓炎動物模型構建

一、實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)模型

(模擬多發性硬化/MS)

1. 經典誘導方法

模型類型適用動物抗原與佐劑疾病進程
主動免疫EAEC57BL/6小鼠MOG??-??肽(100-200 μg)
- 完q弗氏佐劑(CFA)+ 百日咳毒素(PTx,200 ng)
慢性進展性,12-14天發病

SJL/J小鼠PLP???-???肽(50-100 μg)
- CFA + PTx
復發-緩解型,7-10天發病
過繼轉移EAEB6/SJL小鼠- 體外用MOG激活T細胞,靜脈回輸(5×10?個細胞)快速發病(3-5天),避免佐劑干擾

2. 關鍵步驟

  • 免疫方案

    • 皮下注射抗原乳化液(脊柱兩側4點,共100 μL)。

    • PTx腹腔注射(0天及2天,各200 ng)。

  • 疾病評分(0-5分標準):

0: 無癥狀  

1: 尾部無力  

2: 后肢輕癱  

3: 后肢完q癱瘓  

4: 四肢癱瘓  

5: 瀕死狀態

3. 注意事項

  • 品系差異:C57BL/6小鼠需PTx增強血腦屏障穿透,SJL/J小鼠易復發。

  • 病理驗證:脊髓切片LFB染色(脫髓鞘)、CD4+ T細胞浸潤(免疫組化)。


二、病毒性腦脊髓炎模型

(如西尼羅河病毒、單純皰疹病毒等)

1. 西尼羅河病毒(WNV)模型

  • 動物:C57BL/6小鼠(6-8周齡)。

  • 方法

    • 腳墊注射WNV(103-10? PFU),3-7天后出現神經癥狀(震顫、癱瘓)。

  • 檢測

    • 腦組織病毒載量(qPCR)、神經元死亡(Fluoro-Jade C染色)。

2. 單純皰疹病毒(HSV-1)腦炎模型

  • 方法

    • 鼻腔接種HSV-1(10? PFU),病毒沿嗅神經入腦。

  • 病理

    • 海馬和皮層炎癥(Iba1+小膠質細胞活化)、病毒抗原(HSV-gB染色)。


三、細菌/寄生蟲性腦脊髓炎模型

1. 結核性腦膜炎(TBM)模型

  • 動物:BALB/c小鼠。

  • 方法

    • 尾靜脈注射結核分枝桿菌(H37Rv株,10? CFU),4周后腦干出現肉芽腫。

2. 弓形蟲腦炎模型

  • 方法

    • 腹腔注射剛地弓形蟲(ME49株,102-103速殖子),慢性期(4周后)形成腦包囊。


四、腦脊髓炎動物模型構建選擇與驗證要點

研究目標推薦模型檢測終點
自身免疫脫髓鞘MOG??-??誘導EAE臨床評分、脊髓LFB染色
病毒感染致神經損傷WNV顱內接種病毒載量、神經元凋亡
血腦屏障破壞機制過繼轉移EAE熒光s鈉滲透率、ZO-1蛋白表達
慢性神經炎癥弓形蟲ME49感染腦包囊計數(PAS染色)、IFN-γ水平

五、注意事項

  1. 倫理與生物安全

    • 病毒模型需在BSL-2/3實驗室操作(如WNV為BSL-3)。

  2. 對照設計

    • 佐劑對照組(僅CFA+PTx)、空白對照組(PBS注射)。

  3. 動態監測

    • EAE模型需每日評分,病毒模型監測體重和神經癥狀。



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