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CDX模型構建

CDX模型構建

簡要描述:
CDX模型構建:CDX模型是將體外培養的腫瘤細胞系移植到免疫缺陷動物(如裸鼠或NSG小鼠)體內,用于評估腫瘤生長、藥物敏感性及機制研究的模型

更新時間:2025-07-11

訪問量:8

廠商性質:其他

一、CDX模型構建的核心特點

對比項CDX模型PDX模型
細胞來源腫瘤細胞系(如A549、HCT116)患者新鮮腫瘤組織
構建周期2–6周3–12個月
成本
應用場景藥物篩選、機制研究個體化治療、臨床轉化研究

二、CDX模型構建流程

1. 腫瘤細胞準備

  • 細胞系選擇

    • 肺癌:A549(非小細胞肺癌)、H1975(EGFR突變)

    • 結直腸癌:HCT116、SW480

    • 乳腺癌:MCF-7(ER+)、MDA-MB-231(三陰性)

    • 常用細胞系(示例):

    • 需定期STR鑒定,避免交叉污染。

  • 細胞培養

    • 使用含10% FBS的培養基(如DMEM/RPMI-1640),傳代至對數生長期。

    • 胰m消化后計數,調整細胞濃度(通常1×10?–5×10? cells/mL)。

2. 實驗動物選擇

  • 免疫缺陷鼠

    • 裸鼠(BALB/c nude):T細胞缺陷,適合大多數實體瘤。

    • NSG(NOD-scid IL2Rγ?/?):高度免疫缺陷,適合低成瘤性細胞。

  • 飼養環境:SPF級屏障系統,避免感染。

3. 移植方法

(1) 皮下移植(最c用)

  • 步驟

    1. 麻醉小鼠(異f烷或腹腔注射戊巴b妥鈉)。

    2. 背部或側腹皮膚消毒(酒精+d伏)。

    3. 皮下注射腫瘤細胞懸液(100–200 μL,含1×10?–5×10? cells)。

    4. 觀察注射部位是否形成明顯皮丘(避免漏液)。

  • 優點:操作簡單,易于監測腫瘤體積。

(2) 原位移植(模擬腫瘤微環境)

  • 示例

    • 肝癌:脾臟注射(細胞遷移至肝)。

    • 肺癌:氣管內注射或尾靜脈注射(肺轉移模型)。

    • 乳腺癌:乳腺脂肪墊注射(4號乳頭周圍)。

  • 優點:更接近臨床病理特征,但手術難度較高。

(3) 尾靜脈注射(轉移模型)

  • 注射1×10?–1×10? cells(100 μL PBS),4–6周后解剖檢測肺/肝轉移灶。

4. 模型監測與數據分析

  • 腫瘤體積測量

    • 游標卡尺測量長徑(L)和短徑(W),按公式計算:

      Volume=L×W22

    • 每周測量2–3次,體積達1000–1500 mm3時需終止實驗(倫理限制)。

  • 終點指標

    • 腫瘤重量:解剖后稱重。

    • 組織學分析:H&E染色、Ki-67(增殖)、TUNEL(凋亡)。

    • 分子檢測:qPCR/WB檢測靶基因表達。


三、CDX模型的應用

1. 抗腫瘤藥物篩選

  • 分組設計:對照組(PBS)、實驗組(化療藥/靶向藥)。

  • 評價指標:抑瘤率(對照組體積-實驗組體積對照組體積×100%)、生存期。

2. 基因功能研究

  • 構建穩定敲除/過表達細胞系(如CRISPR-Cas9),比較成瘤能力差異。

3. 免疫治療模型(需人源化小鼠)

  • 共移植人PBMC或免疫檢查點抑制劑(如抗PD-1抗體)。


四、常見問題與解決方案

問題可能原因解決方案
腫瘤不成瘤細胞活性低/接種量不足提高細胞數(5×10? cells),改用NSG小鼠
腫瘤生長不均勻注射技術不穩定統一由同一操作者注射,避免氣泡
動物死亡或感染手術創傷/無菌操作不當術后抗生素預防(如恩n沙星)


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